根據(jù)《關(guān)于加快推進(jìn)新冠病毒核酸檢測(cè)的實(shí)施意見》聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制綜發(fā)﹝2020﹞181號(hào)的文件要求,各地及縣域內(nèi)的核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)陸續(xù)建成,并逐步投入使用,那么具有新冠病毒核酸檢測(cè)能力的實(shí)驗(yàn)室的安全要求是否真正符合生物安全要求,中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)衛(wèi)生工程分會(huì)副主任委員中國微生物學(xué)會(huì) 生物安全專委會(huì)副主任委員江蘇省疾病預(yù)防控制中心所長謝景欣教授在新冠肺炎相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)宣貫會(huì)上,依據(jù)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范及其他一系列的衛(wèi)生行標(biāo),重點(diǎn)依據(jù)GB19489-2008,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)以問答的形式進(jìn)行深入的解讀和分享,筆者對(duì)其內(nèi)容整理回憶,以便大家參考。
問1:PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心控制目標(biāo)
1. 控制病原污染:保證生物安全,防止病原污染操作人員和環(huán)境
2. 控制核酸污染:保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,防止核酸污染試劑、樣本、操作過程
問2:實(shí)驗(yàn)室需要幾個(gè)功能區(qū)?
傳統(tǒng)PCR分為四區(qū):試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、核酸擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)
本次新冠:
使用RT-PCR需三個(gè)區(qū):試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)
使用一體機(jī),需要二個(gè)區(qū):試劑準(zhǔn)備區(qū)、提取擴(kuò)增分析區(qū)
問3:實(shí)驗(yàn)室各個(gè)區(qū)必須相鄰布置嗎?
不 是 實(shí)驗(yàn)室可分為兩種形式:
分散布置形式——各個(gè)區(qū)不相鄰
集中布置形式——各個(gè)區(qū)相鄰
分散形式:各個(gè)實(shí)驗(yàn)室用房彼此相距較遠(yuǎn),呈分散布置形式;各個(gè)實(shí)驗(yàn)室之間不易產(chǎn)生交叉污染;簡(jiǎn)化復(fù)雜的“特殊”的條件要求。
問4:必須設(shè)置樣本接收室嗎?
不是 可直接進(jìn)入樣本制備間
若在樣本接收室進(jìn)行滅活等操作,診室應(yīng)為BSL-2(在生物安全柜中打開樣本包裝盒,對(duì)采樣管等進(jìn)行表面消毒,而后拿出進(jìn)行滅活)
問5:一定要設(shè)緩沖間嗎?
是 緩沖間是阻隔空氣交換的首要措施。
集中式,一定需要PCR專用走廊?
不,首先設(shè)置緩沖間,所謂PCR走廊并無多少積極作用。面積不足時(shí),不設(shè)走廊。
關(guān)于PCR專用走廊作用:主要是將實(shí)驗(yàn)室與其他區(qū)域分開,而這種分開并無實(shí)質(zhì)性意義,在控制交叉污染方面,并無多少積極作用。相反,更易導(dǎo)致交叉污染,應(yīng)優(yōu)先設(shè)置緩沖間。若設(shè)走廊,可作共用前室,存放備用物品,放置更衣柜,以更換清潔工作衣帽,不可在工作區(qū)儲(chǔ)存?zhèn)溆梦锲贰?/span>
問6:PCR走廊必須前后兩個(gè)出口嗎?
不是,臨檢導(dǎo)則:進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照單方向進(jìn)行,即:試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→核酸擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū) ,上述核心指單向工作流程而非人員“一去不復(fù)返”
注意:上述單項(xiàng)工作流程?指同一批人“串聯(lián)工作”
實(shí)際工作中?時(shí)常,不同人員同時(shí)在不同區(qū)域,“并聯(lián)工作”,因此,說不上“按單一方向進(jìn)行”
走廊乃清潔區(qū)-因此,所謂的“PCR走廊”并非需設(shè)前后兩個(gè)出口-更何況完全可以不要這條走廊。
問7:實(shí)驗(yàn)室必須設(shè)污物走廊?潔污分流?
不是 實(shí)驗(yàn)室生物安全的本質(zhì):不允許污染外泄,廢棄物可安全打包,必要時(shí)表面消毒,安全運(yùn)送出來滅活。也可原地消毒----即無“污物”,則不需污物走廊
難道設(shè)了污物走廊就可以讓走廊被污染嗎?可以肆無忌憚?皆不可以!
設(shè)置污物走廊(帶來問題)1.擠占面積2.實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)復(fù)雜化(多開口,多通道)3.實(shí)驗(yàn)室操作復(fù)雜化(管理體系更復(fù)雜)……諸多問題
問8:必須設(shè)置傳遞窗嗎?
不是 根據(jù)需要設(shè)置,適于難于隨身攜帶時(shí)
不需要“潔污分流”
分散式:各區(qū)之間無傳遞窗可言
集中式:需要特別注意:樣本制備間與核酸擴(kuò)增之間,易有交叉污染,--是否設(shè)置,需根據(jù)具體情況進(jìn)行評(píng)估
其他毗鄰工作區(qū):相互之間,空氣交換并不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果---為了方便,宜設(shè)置
問9:是否一定要用B2型生物安全柜?
不是 無論是A2還是B2均符合生物安全要求。
A2與 B2有好壞之分嗎?
沒有 生物安全防護(hù)性能是“相同”的,均符合要求,無“高低貴賤”之分。
適用性不同
BSC-II-B1/B2型-適用于散發(fā)有毒有害氣體的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)
BSC-II-A1/A2型-適用于不散發(fā)有毒有害氣體的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)
選擇BSC-II- B2,需注意:
負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì),選用B2生物安全柜,需要特別當(dāng)心,易出現(xiàn)問題。B2排風(fēng)量很大,啟動(dòng),停止,實(shí)驗(yàn)室壓力急劇變化。謹(jǐn)慎選用:排風(fēng)翻N倍多,啟停過程壓力波動(dòng)很大,控制難度很大,甚至運(yùn)行失控,失敗,需格外謹(jǐn)慎。
問10:實(shí)驗(yàn)室(含緩沖間)必須設(shè)置洗手池嗎?
不是 樣本制備間:是BSL-2/3實(shí)驗(yàn)室 GB19489-2008如果實(shí)驗(yàn)室不具備供水條件,則應(yīng)設(shè)非手動(dòng)手消毒滅菌裝置
可以設(shè)洗手池的前提是-應(yīng)有下水消毒滅菌措施,(活毒廢水滅活設(shè)施),不得將污染物